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梅里埃酵母菌鑒定卡相關藥敏試驗方法介紹

發(fā)布時間: 2023-02-06  點擊次數(shù): 1222次
  梅里埃酵母菌鑒定卡在實驗室中很常見,酵母菌作為一類重要的真菌,被廣泛應用于人類的生產(chǎn)活動中。微基生物專注微生物多樣性研究,為高校、醫(yī)院、研究所等單位提供科研服務。不僅可以檢測土壤、水體、糞便、腸道內(nèi)容物等樣本中混合微生物的種類及豐度,而且還可以提供細菌、真菌等純菌的菌種鑒定服務。
 
  梅里埃酵母菌鑒定卡菌種鑒定一般是提取純菌A的基因組DNA,然后PCR擴增16srDNA片段,之后通過一代測序或三代測序檢測16SrDNA的全長,與國際上的數(shù)據(jù)庫進行比對,默認選取比對結果中相似性高的物種分類信息,之后構建系統(tǒng)發(fā)育樹,然后得出樣本A與XX物種的相似性高。
 
  操作規(guī)程:
 
  1、取血平板上的單個菌落制片,做革蘭氏染色鏡檢證實為真菌。
 
  2、從冰箱取出鑒定卡(YBC),待恢復至室溫后取出編號,放到卡片架上。
 
  3、濁度計校零及100%,用裝有結晶紫的試管調(diào)零,用0.45%的鹽水管調(diào)100%。
 
  4、挑取經(jīng)純化的單個菌落,用濃度為0.45%鹽水,配制成2麥氏單位濃度的菌懸液。
 
  5、放入填充箱內(nèi)填充,待填充完成后用塞子封口,檢查和排除氣。
 
  6、把卡片放在30℃的孵箱內(nèi)孵育18~24小時,然后放入閱讀箱內(nèi),儀器自動讀卡。
 
  7、同時做手工藥敏試驗:有2種方法:
 
  8、配制0.5麥氏單位濁度該菌液,用棉簽均勻涂于念珠菌藥敏平板上,待5min后貼相應藥敏紙片,35℃培養(yǎng)24~48小時,讀取低抑菌濃度(MIC)并報告。
 
  9、用0.9%生理鹽水配制0.5麥氏單位濁度該菌液,再用0.9%生理鹽水1﹕1稀釋,吸取0.5ml菌懸液到念球菌藥敏平板,用棉簽均勻涂布,棄去多余的菌懸液,放置5分鐘后貼藥片,35℃培養(yǎng)18~24h,測量抑菌環(huán)直徑并報告。

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